Водяной орех: перспективы использования в медицинской и фармацевтической практике



Цитировать

Полный текст

Аннотация

Представители рода Trapa (рогульник, водяной орех, водяной кальтроп, чёртов орех, чилим) – реликтовые однолетние водные растения семейства Lythraceae (Дербенниковые). Данное растение введено в культуру в разных странах мира и с древних времен используется в пищевых целях. Перспективно применение рогульника в фитотерапии. Анализ литературных данных показал возможность медицинского применения таких частей растения, как листья, корни, ядра плодов, но особенно большое значение придается кожуре плодов рогульника. Водяной орех проявляет различные виды фармакологической активности, такие как антиоксидантное, гепатопротекторное, противовоспалительное, противораковое, противогрибковое, антибактериальное действие. Значительное количество исследований доказывают гипогликемическую активность различных частей растения и возможность использования как пищевой добавки для естественной терапии гипергликемии или лекарственного средства при сахарном диабете. С помощью снижения уровня конечных продуктов гликирования при применении экстракта оболочек плодов водяного ореха показана перспективность растения в лечении бесплодия. Продемонстрирован антимикробный потенциал водяного ореха против синегнойной палочки, метициллинрезистентного золотистого стафилококка, патогенных видов грибов рода Кандида, что подтверждает возможность применения этого растения против микробных инфекций. Антипролиферативный эффект растения ряд исследователей связывают с фенольными соединениями. Показана эффективность экстрактов и выделенных групп веществ из различных частей рогульника против рака толстой кишки, опухоли молочной железы, раковой опухоли шейки матки, гепатоцеллюлярной карциномы человека, аденокарциномы желудка, глиомы.

В данном обзоре проанализированы данные 43 отечественных и зарубежных источников литературы, посвященных анализу возможностей использования Trapa natans, а также его подвидов, в медицине и фармации. Все источники размещены в открытой базе данных eLIBRARY и PubMed. Настоящий обзор поможет оценить перспективность дальнейшего изучения представителей рода Trapa в качестве источника ценных биологически активных веществ и его терапевтический потенциал.

Полный текст

Актуальность

Поиск эффективных, безопасных и доступных лекарственных средств остается на данный момент актуальной задачей медицины и фармации. Одним из важнейших источников лекарственных средств являются лекарственные растения. Фитотерапевтические средства обладают рядом преимуществ перед продуктами химической промышленности, таких как относительная безопасность и многогранность фармакологических эффектов. Рогульник (водяной орех, водяной каштан, чёртов орех, чилим) – род реликтовых однолетних водных растений (Trapa) семейства Дербенниковые (Lythraceae). У водяного ореха образуются уникальные среди водных растений плоды с одревесневающим околоплодником и необычно крупными семенами. Рогульник, характеризуясь дизъюнктивным ареалом, встречается в центральных районах европейской части России, на юге Западной Сибири и на Дальнем Востоке, широко распространен во многих регионах Европы, Азии, Африки. Известно, что данное растение введено в культуру в разных странах мира и с древних времен используется в различных целях, в том числе в пище56вых. Перспективно применения рогульника и в медицинской практике [1, 2, 3, 4, 5, 6]. Возможно культивирование эмбрионов T. natans in vitro, в аквариуме, а также интродукция в водоемы, что решает проблему недостаточной распространенности растения в отдельных регионах [7].

Следует отметить запутанность и сложность внутриродовой систематики рода Trapa. Относительно количества видов в роде имеются противоположные точки зрения, что обусловлено морфологической вариабельностью, значительным разнообразием его форм и гибридизацией. С одной стороны, рогульники рассматриваются в рамках одного вида Trapa natans L. s. l. (рогульник плавающий), или выделяют два вида T. natans и T. incise Sieb & Zucc., а вариабельность T. natans описывают рядом разновидностей. Сторонники другого мнения считают видами многочисленные морфотипы на протяжении ареала рода рогульник, при этом количество видов достигает пятидесяти [2, 8, 9, 10]. Остается актуальным определение фармакологической активности рогульника с целью дальнейшего использования препаратов данного растения в фитотерапии.

В данной работе будут рассмотрены аспекты и перспективы использования Trapa natans и его подвидов в медицинской практике.

Высокая ценность рогульника как пищевого, кормового и лекарственного растения обуславливаются его химическим составом. В исследованиях отечественных и зарубежных ученых отмечена выраженная фармакологическая активность таких частей растения, как листья [11, 12], корни [13], стебли [14, 15], ядра плодов [16]. Особенно большое внимание уделяется кожуре плодов рогульника [3, 5, 7, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 27]. Исследования химического состава плодов рогульника показывают, что различные части растения могут служить источником как органических веществ, так и макро- и микроэлементов. Рядом ученых подтверждена возможность использования препаратов на основе рогульника в медицинской практике.

Гепатопротекторная активность.

В народной медицине азиатских стран горячий водный настой плодов рогульника используется в качестве гепатопротекторного средства [27]. Рядом зарубежных ученых данный эффект выявлен у экспериментальных животных при введении изониазида и рифампицина, четыреххлористорого углерода, парацетамола. Так, Talib Hussain и соавторами установлено, что применение экстракта околоплодника T. natans вызывает значительное снижение гепатотоксичности у крыс, вызванной противотуберкулезными препаратами (изониазид + рифампицин), которые оказывают негативное влияние на печень, связанное с повышением уровня пероксидного окисления липидов. Пероральное введение 50%-го спиртового экстракта околоплодника водного ореха приводило к повышению массы тела опытных животных, уменьшению массы печени, нормализации показателей печеночных проб (снижение активности аспартат- и аланинаминотрансферазы, щелочной фосфатазы, лактатдегидрогеназы, уменьшение концентрации билирубина, холестерина и повышение содержания альбумина). Кроме того, показано ингибирование процесса пероксидного окисления липидов благодаря повышению активности антиоксидантных ферментов (супероксиддисмутазы и каталазы), нормализации уровня глутатиона в печени крыс, получавших изониазид и рифампицин. Гистологические наблюдения за тканями печени коррелировали с биохимическими наблюдениями (ослабление гепатоцеллюлярного некроза, уменьшение воспалительного процесса. инфильтрации клеток) [17]. Гепатопротекторная активность оболочки плодов Trapa natans показана и при повреждении печени у белых крыс линии Вистар, вызванном парацетамолом. Биохимические показатели сыворотки крови (уровень сывороточной аспартатаминотрансферазы, аланинаминотрансферазы, щелочной фосфатазы, общего белка, билирубина, холестерина, триглицеридов) продемонстрировали выраженный защитный эффект обезжиренного этилацетатного и метанольного экстракта околоплодника Trapa natans, причем метанольный экстракт был более эффективен [28].

Shih-Hao Wang и соавт. (Китай) изучали гепатопротекторную активность водного экстракта оболочки плодов Trapa taiwanensis Nakai. Все определения показали, что водный экстракт является мощным антиоксидантом. Гепатопротекторную активность Trapa taiwanensis Nakai оценивали на крысах-самцах Sprague-Dawley при пероральном введении четыреххлористого углерода. Пероральное введение водного экстракта в дозе 125 мг/кг массы тела было более эффективным, чем силимарин в дозе 200 мг/кг массы тела. По результатам биохимических анализов, пероральный прием настоя Trapa taiwanensis Nakai в средних и высоких дозах эффективно снижал вызванное CCl4 повышение активности аланинаминотрансферазы и аспартатаминотрансферазы [27].

Кроме того, показано положительное влияние галлотаннина, 1,2,3,6-тетра-О-галлоил-β-D-глюкопиранозида, выделенного из околоплодника рогульника, при неалкогольной жировой болезни печени. Применение данного вещества (15 и 30 мг/кг/день) подавляло увеличение массы тела и снижало отложение липидов у мышей, вызванной диетой с высоким содержанием жиров. Отмечено снижение резистентности к инсулину, интенсивности окислительного стресса и воспалительных процессов, что приводило к восстановлению функции печени у мышей. Галлотаннин нормализовал сигнальные пути, включая АМФ-активируемая протеинкиназа/белки, связывающие регуляторный элемент стерола/Ацетил-КоА-карбоксилаза (AMPK/SREBP/ACC), белки субстрата инсулинового рецептора/Серин/треонин-протеинкиназа 1 (IRs-1/Akt), киназы IκB/ингибиторы ядерного фактора κB/транскрипционный фактор NF-κB (IKK/IκB/NF-κB) у мышей с индуцированной патологией, а также улучшал состояние микрофлоры кишечника [19].

Таким образом, водяной орех проявляет антиоксидантный и гепатопротекторный эффект.

Гипогликемический эффект.

Плоды T. natans используются в Китае как народное средство против сахарного диабета [18]. Зарубежными учеными проведен ряд экспериментов с целью научного обоснования терапевтического эффекта растения.

Lu H. и соавтороами (Китай) показана гипогликемическая активность Trapa natans. В этом исследовании протестированы экстракты околоплодника растения как in vitro, так и in vivo. Эксперимент включал создание модели сахарного диабета 2 типа на мышах (путем однократной инъекцией стрептозотоцина), получавших диету с высоким содержанием жиров. Полученный этанольный экстракт околоплодника концентрировали, суспендировали в воде и последовательно фракционировали петролейным эфиром, этилацетатом и н-бутанолом. После четырехнедельного приема этилацетатный экстракт околоплодника Trapa natans (50 и 100 мг/кг массы тела) снижал уровень глюкозы в крови натощак, улучшал показатель пероральной толерантности к глюкозе и снижение резистентности к инсулину, а также нормализовал уровень липидов в сыворотке крови у мышей с сахарным диабетом 2 типа. Этилацетатная фракция околоплодника водяного ореха обладает наивысшей антидиабетической активностью. Эта фармацевтическая активность, возможно, опосредована нарушением абсорбции глюкозы в желудочно-кишечном тракте и стимуляцией чувствительности к инсулину. Экстракты околоплодника Trapa natans проявляли ингибирующую активность в отношении α-амилазы и α-глюкозидазы. Введение этилацетатного экстракта приводило к активации фосфорилирования серин/треонин-протеинкиназы 1 и белков субстрата инсулинового рецептора, что может привести к снижению резистентности к инсулину у мышей с сахарным диабетом 2 типа [18].

Индийскими учеными проведено исследование гипогликемического эффекта экстракта корня Trapa natans L. на крысах Wistar с сахарным диабетом, индуцированным стрептозоцином. Для получения экстракта высушенные крупноизмельченные корни экстрагировали этанолом (95% по объему) в аппарате Сокслета и сушили в вакууме при температуре 45°С в ротационном испарителе. Экстракт фракционировали с использованием петролейного эфира, хлороформа и метанола. Каждую фракцию сушили и хранили при 4°С. Глибенкламид использовали в качестве положительного контроля снижения уровня глюкозы в крови. Показано, что этанольный экстракт корней и его фракции, в особенности метанольная, обладают выраженным сахароснижающим эффектом. Также установлено, что экстракт, а также его фракции не вызывают усиления пероксидного окисления липидов и гепатотоксичности [13].

Компонентный ВЭЖХ-анализ показал, что этилацетатная фракция этанольного экстракта околоплодника богата фенольными соединениями, особенно гидролизуемыми дубильными веществами [18]. Гипогликемический эффект, возможно во многом обусловлен присутствием в экстракте галлотаннина (1,2,3,6-тетра-О-галлоил-β-D-глюкопиранозида) [19]. Высокое содержание фенолов обусловило также ингибирующую активность в отношении α-глюкозидазы и панкреатической липазы [3, 29]. Сахароснижающий эффект фенольных соединений T. natans (ряд гидролизуемых танинов, лигнанов, флавоноидов, норлигнанов) подтверждают и другие исследования. Их использование приводило к усилению активности поглощения глюкозы в мышечных трубочках [30].

Midori Yasuda и соавт. (Япония) проводили исследования полифенольных соединений из оболочки плодов рогульника (Trapa japonica) и оценивали их влияние на уровень глюкозы в эксперименте. Три гидролизуемых полифенола - эвгенин, 1,2,3,6-тетра-О-галлоил-β-d-глюкопираноза и трапаин - были преобладающими с содержанием в сухой массе 2,3 ± 0,0, 2,7 ± 0,1 и 1,2 ± 0,1 г/100 г, соответственно. Эти вещества проявляли ингибирующую активность в отношении α-амилазы (>80% при 0,15 мг/мл) и α-глюкозидазы. У мышей введение данных веществ (40 мг/кг) значительно снижало уровень глюкозы в крови и инсулина в сыворотке, что оценивалось с помощью теста на толерантность к углеводам [5].

В отчете Masao Jinno и соавторами (Япония) представлено первое успешное рандомизированное клиническое исследование лечения бесплодия с помощью снижения уровня конечных продуктов гликирования при применении экстракта оболочек плодов Trapa bispinosa Roxb. Конечные продукты гликирования накапливаются при инсулинорезистентности и старении, нарушают фолликулогенез и могут снижать рецептивность эндометрия. Экстракт высушенных оболочек плодов Trapa bispinosa Roxb. значительно ингибирует образование конечных продуктов гликирования in vitro и увеличивает количество живорождений у пожилых пациенток, использующих вспомогательные репродуктивные технологии. Кумулятивная частота живорождения среди пациенток, получающих экстракт (100 мг/день), составила 47 %, что значительно выше, чем в контрольной группе (16 %). Обе группы перед исследованием прошли 1 цикл традиционного лечения бесплодия; стимуляцию яичников, извлечение яйцеклеток, экстракорпорального оплодотворение/инъекции интрацитоплазматических сперматозоидов и переноса эмбрионов [24].

Эти результаты подтвердили потенциал использования данного растения в качестве пищевой добавки или лекарственного средства для лечения и профилактики сахарного диабета.

Противоопухолевая активность. Limei Wang и соавторы (Китай) определили, что оболочка плодов рогульника Trapa bispinosa обладает противоопухолевой активностью, возможно, благодаря высокому содержанию полифенолов. Результаты анализа CCK-8 показали, что 1,2,3,6-тетра-О-галлоил-β-D-глюкоза может значительно ингибировать пролиферацию клеток рака желудка SGC7901, и эффект был близок к эффекту 5-фторурацила. При дозе 200 мкг/мл и времени инкубации 48 ч клетки SGC7901 оставались в фазе G1, происходил апоптоз, повышалась внутриклеточная концентрация ионов кальция и снижался мембранный потенциал митохондрий. Секвенирование транскриптома показало, что дифференциально экспрессируемые гены были в основном обогащены сигнальным путем Р53, связанным с апоптозом. Результаты полимеразной цепной реакции в реальном времени и вестерн-блоттинга показали, что 1,2,3,6-тетра-О-галлоил-β-D-глюкоза может индуцировать апоптоз клеток SGC7901, повышая уровни экспрессии генов P21, PUMA, PERP и IGF-BP3, снижая экспрессию гена CyclinD, повышая уровни экспрессии цитохрома С, белка каспаза-3, каспаза-9 и снижая содержание белка BCL-2 [20].

Экстракты из стеблей T. quadrispinosa, полученные методом ультразвуковой ферментативной экстракции и содержащие наибольшее количество фенольных соединений, показали следующие значения IC50 против опухолевых клеток Hela, HepG-2 и U251: 160,4 ± 11,6 мкг/мл, 126,1 ± 10,8 мкг/мл и 178,3 ± 13,1 мкг/мл, соответственно. Обработка опухолевых клеток экстрактами T. quadrispinosa привела к появлению выраженных признаков ингибирования роста, включая уменьшение количества клеток и уменьшение их объема, увеличение количества клеток, находящихся в состоянии апоптоза. Фенольные экстракты из стеблей T. quadrispinosa обладали значительной противоопухолевой активностью, влияя на клеточную пролиферацию и выживаемость [15].

Экстракт ядер плодов рогульника Trapa natans продемонстрировал антипролиферативный потенциал при тестировании клеточной линии рака толстой кишки человека (Colo-205), клеточной линии протоковой эпителиальной опухоли молочной железы человека (T47D) и клеточной линии аденокарциномы молочной железы человека (MCF7), возможно, благодаря антиоксидантному действию полифенолов [16].

В исследовании Naheed Ahmad и соавторами рассматривается использование экстракта биоотходов Trapa natans для экологически чистого синтеза наночастиц серебра, золота и биметаллических композитов, которые могут быть эффективны для лечения рака. Au-Ag-наночастицы вызывали цитотоксичность в различных раковых клетках (HCT116, MDA-MB-231 и HeLa) при концентрации 200 мкг/мл. Раковые клетки, подвергшиеся воздействию Au-Ag-наночастиц, демонстрировали апоптотические признаки, такие как конденсация ядер, потеря мембранного потенциала митохондрий, расщепление каспазы-3 и поли-(АДФ-рибоза)-полимеразы. Обработка наночастицами приводила к гибели клетки HCT116 WT и p53-нокаутные клетки. Биметаллические наночастицы, полученные из экстракта кожуры Trapa, значительно увеличили образование активных форм кислорода, что эффективно запускало p53-независимый апоптоз в различных раковых клетках [31].

Антимикробная активность.

Ряд исследований доказывают антимикробную активность экстрактов листьев рогульника in vitro. Причем водный экстракт не проявляет антибактериальной активности, а ацетоновый экстракт показывает наивысшую степень эффективности. Так, установлено антибактериальное действие в отношении Pseudomonas aeruginosa, минимальная подавляющая концентрация составляла 313 мкг/мл. Эффект экстрактов был более выражен против грамположительных бактерий (минимальная ингибирующая концентрация (МИК) составляла <78–625 мкг/мл). Экстракты показали значительное влияние на Aspergillus strictus (МИК <78/156 мкг/мл). Применение метода газовой хроматографии и газовой хроматографии, совмещенной с масс-спектрометрией этилацетатного экстракта, выявило идентификацию 22 соединений, среди наиболее распространенных из которых сквален (20,2%), н-алканы и норлигнан - хинокирезинол. Такими методами T. natans изучали впервые. Известно, что сквален является тритерпеном и обладает антимикробной активностью, а хинокирезинол проявляет также антиоксидантную и антиатерогенную активность [11].

Другими исследователями также установлена противомикробная активность экстрактов листьев Trapa natans в отношении патогенной бактерии Pseudomonas aeruginosa. Установлено подавление выработки пиоцианина и эластазы и уменьшение зоны роста патогена ацетоновым и метанольным экстрактом листьев по сравнению с контрольными посевами P. aeruginosa. Этил-ацетатный экстракт не оказывал никакого эффекта. Биологически активные концентрации экстрактов не были токсичными в модельной системе рыбок данио-рерио. Экстракты, а также их основные компоненты, эллаговая и феруловая кислоты, продемонстрировали способность влиять на сигнальные пути P. aeruginosa [12].

Еще одним патогенным микроорганизмом, требующим поиска новых терапевтических стратегий, является метициллин-резистентный золотистый стафилококк (MRSA). Yu-Wei Chang и соавт. (Тайвань) показали, что теллимаграндин II, чистое соединение, выделенное из скорлупы плодов Trapa bispinosa, обладает антибактериальным действием против MRSA. Причем минимальная ингибирующая концентрациея составила 128 мкг/мл. Предположено, что теллимаграндин II может самостоятельно проявлять антистафилококковую активность, а в сочетании с низкими дозами антибиотиков оказывает синергетический эффект против патогенного микроорганизма. Более того, обнаружено, что вещество проявляет бактерицидную активность путем снижения экспрессии mecA и негативной регуляции пенициллин-связывающего белка PBP2a метициллин-резистентного золотистого стафилококка. Изображения, полученные с помощью трансмиссионной электронной микроскопии, подтвердили, что теллимаграндин II разрушал целостность клеточной стенки бактерии и приводил к потере содержимого цитоплазмы. Таким образом, показана возможность снизить эффективную дозу современных антибиотиков и преодолеть проблему лекарственно-устойчивых изолятов S. aureus [25].

Б.Р. Кулуевым и соавторами показано, что экстракты кожуры плода рогульника (спиртовой, гексановый, пептидный) обладают антибактериальной активностью. В то же время экстракт семян водяного ореха такой антибактериальной активностью не обладал [7, 26].

Из плодов Trapa natans выделен и очищен противогрибковый растительный пептид с молекулярной массой 1230 Да и назван Tn-AFP1. Определение аминокислотной последовательности этого пептида с помощью тандемной масс-спектрометрии показало, что он содержит одиннадцать аминокислотных остатков. Очищенный Tn-AFP1 продемонстрировал ингибирование роста Candida тропических растений in vitro, нарушал образование биопленок в зависимости от концентрации. Он также показал снижение экспрессии генов MDR1 (кодирует эффлюксный переносчик, который способен обеспечивать устойчивость к флуконазолу) и ERG11 (кодирует фермент-мишень азолов, точечные мутации в котором могут являться причиной резистентности к флуконазолу) при анализе ПЦР в реальном времени. Молекулярное моделирование in silico предсказало структуру Tn-AFP1 как одинарного клубка, имеющего дисульфидную связь. Характеристика Tn-AFP1 может способствовать разработке новых производных данного пептида, обладающих антимикотическим действием [32].

Все приведенные исследования демонстрируют антимикробный потенциал Trapa natans против P. aeruginosa, метициллин-резистентного золотистого стафилококка, патогенных видов грибов рода Candida и подтверждают возможность применения этого растения против микробных инфекций.

Антиоксидантная и иммуностимулирующая активность.

Показана выраженная антиоксидантная активность околоплодника рогульника [21, 3, 22]. Антиокисидантную активность растения связывают с наличием в химическом составе полифенолов и полисахаридов. Причем антиоксидантная активность полифенолов водяного ореха была значительно выше, чем у аскорбиновой кислоты, использованной в качестве положительного контроля. Результаты также показали, что полифенолы околоплодника, содержащие гексагидрокси-дифенильные группы, такие как ноботанин D, эвгениин и трапаин, а также полифенолы с более высоким содержанием галловой кислоты, обладают наиболее выраженными антиоксидантными свойствами. Активность неочищенных полифенолов рогульника относительно 2,2-дифенил-1-пикрилгидразила (DPPH-радикалов) составила 7,21 ± 0,39 мкмоль ТЕ/г [21]. Результаты исследований Yon-Suk Kim и соавт. (Республиа Корея) также показали, что антиоксидантная активность экстрактов околоплодника Trapa japonica выше, чем у витамина С. Антиоксидантные свойства экстрактов оценивались с помощью нескольких биохимических анализов: 2,2-дифенил-1-пикрилгидразила (DPPH), алкильных радикалов, гидроксильных радикалов, восстановительной антиоксидантной силы железа (FRAP), активности 2,2-азинобис(3-этилбензтиазолин)-6-сульфоновой кислоты (ABTS) и емкости поглощения кислородных радикалов (ORAC). Предположено, что экстракты околоплодника T. japonica обладают антиоксидантными свойствами благодаря своей способности предотвращать токсичность, вызванную бутилгидропероксидом, что повышает жизнеспособность клеток, снижает продукцию реактивных форм кислорода, подавляет окислительное повреждение и дисфункцию митохондрий. Таким образом, на основании полученных результатов можно предположить, что экстракты околоплодника T. japonica обладают потенциалом защиты печени от бутилгидропероксид-индуцированного повреждения клеток и могут рассматриваться как потенциальный функциональный продукт питания [33].

Водный экстракт оболочки плодов Trapa taiwanensis Nakai был подвергнут анализу на α,α-дифенил-β-пикрилгидразильную активность, восстановительную силу, антиоксидантную способность, эквивалентную Тролоксу. Все исследования показали, что водный экстракт Trapa taiwanensis Nakai является мощным антиоксидантом, возможно, благодаря наличию большого количества галловой и эллаговой кислот [27]. Значения концентрации полумаксимального ингибирования IC50 водного экстракта оболочки плодов Trapa natans для различных моделей антиоксидантов составили: 128,86 мкг/мл - для радикалов DPPH, 97,65 мкг/мл - для O2•-, 148,32 мкг/мл - для H2O2 и 123,01 мкг/мл - для NO [22].

Полисахариды водяного ореха также могут быть исследованы как потенциальные антиоксиданты для использования в медицине или функциональных продуктах питания. Показано, что полисахариды из стеблей Trapa quadrispinosa., полученные с помощью ультразвуковой экстракции, продемонстрировали высокую активность в нейтрализации радикалов 1,1-дифенил-2-пикрилгидразила, 2,2-азинобис(3-этилбензтиазолин)-6-сульфоновой кислоты (ABTS) и значительную общую антиоксидантную емкость [14].

Показано, что двухфазная ферментация скорлупы плодов Trapa bispinosa с использованием грибов-трутовиков Ganoderma sinense изменяет состав и структуру полисахаридов, а также состав спиртового экстракта, что может повысить иммуномодулирующую и антиоксидантную активность продуктов. Оптимальные условия ферментации следующие: продолжительность 2 дня, температура 14°C и влажность 77%. При таких условиях наблюдался максимальный выход экстракта и скорость удаления свободных радикалов DPPH. Повышенная активность может быть объяснена изменениями в структуре полисахаридов и компонентов спиртового экстракта. Спиртовые экстракты до и после ферментации были проанализированы на наличие полифенолов и флавоноидов, с использованием ультраэффективной жидкостной хроматографии - квадрупольной масс-спектрометрии с тандемным временем прохождения. Для сравнения иммуностимулирующей способности полисахаридов и антиоксидантной активности экстрактов использовались мышиные макрофаги (RAW 264,7). Спиртовой экстракт, полученный из скорлупы после ферментации, продемонстрировал более высокую антиоксидантную активность, причем его действие связано с Nrf2/Keap1-ARE-путем [23].

Полисахариды из скорлупы после ферментации с использованием грибов-трутовиков Ganoderma sinense, способствовали увеличению секреции клетками мышиных макрофаков NO, индуцибельной синтазы оксида азота, интерлейкина-2, интерлейкина-10 и TNF-α по сравнению с полисахаридами, очищенными до ферментации. Таким образом, полисахариды продемонстрировали повышенную иммуностимулирующую способность, их действие было связано с NF-κB-путем [23].

Изучено защитное действие водных и метанольных экстрактов плодов Trapa bispinosa на клеточную линию нейробластомы (NB-41), обработанную перекисью водорода (H2O2). Анализировали жизнеспособность клеток, уровень оксида азота (NO), мРНК и белковые профили и сравнивали с контрольными клетками. Показан защитный эффект экстракта на нейрональные клеточные линии через модуляцию активности нейрональной синтазы оксида азота (nNOS) [34].

Результаты исследования Hidetoshi Ishida и соавт. (Япония) свидетельствуют о противокатарактальном и антиоксидантном действии комплекса лютеина и экстракта водяного ореха (Trapa bispinosa Roxb.) при экспериментальной катаракте у крыс. Наиболее значимыми факторами являются максимальное воздействие на хрусталик глаза стрессовых факторов окружающей среды, включая окислительную и гликативную нагрузку. Прием антиоксидантных и антигликативных добавок, таких как лютеин и экстракта водяного ореха, может снизить риск прогрессирования катаракты. Уровни мРНК антиоксидантных белков, пероксиредоксина 6 и каталазы исследовали с помощью количественной полимеразной цепной реакции в реальном времени. По сравнению с контрольной группой помутнение хрусталика у крыс с катарактой, получавших пищевую добавку, было менее выражено во всех экспериментах. Уровни экспрессии мРНК пероксиредоксина 6 и каталазы в эпителиальных клетках хрусталика крыс с катарактой и аналогичных культивированных клетках человека увеличились после введения лютеина и экстракта водяного ореха. Таким образом, добавка лютеин+экстракт водяного ореха может быть полезна для замедления прогрессирования катаракты [35].

D.B. Ambikar и соавторы (Индия) продемонстрировали антиоксидантный эффект спиртового экстракта T. bispinosa в мозге самок мышей-альбиносов на фоне индуцированного оксидативного сресса. Оксидативный стресс вызывался обработкой 5% раствором D-галактозы в течение 15 дней, что приводило к усилению флуоресценции, перекисного окисления липидов и снижению уровня антиоксидантных ферментов (глутатионпероксидазы и каталазы), в коре головного мозга. После обработки водно-спиртовым экстрактом T. bispinosa (500 мг/кг) наблюдалось снижение уровня флуоресценции в коре головного мозга, подавление пероксидного окисления липидов и восстанавление активности глутатионпероксидазы и каталазы в коре головного мозга по сравнению с контрольной группой с ускоренным старением. Экстракт оказался эффективным антиоксидантным средством, способным в определенной степени обратить вспять вызванные D-галактозой изменения старения, обусловленные окислительным повреждением [36].

Противовоспалительная активность.

Обнаружено, что хлороформная фракция этанольного экстракта перикарпа Trapa japonica ингибировала индуцированную липополисахаридом выработку оксида азота NO и внутриклеточных активных форм кислорода в клетках макрофагов RAW264.7. Кроме того, экспрессия генов циклооксигеназы-2 и индуцибельной синтазы оксида азота была снижена, что показано методом вестерн-блоттинга. Результаты исследований Kim Y.-S. и соавт. свидетельствуют о том, что хлороформная фракция оказывает противовоспалительное действие, снижая экспрессию генов циклооксигеназы-2 и индуцибельной синтазы оксида азота путем ингибирования MAPK (митоген-активируемой протеинкиназы) и NF-κB (ядерного фактора «каппа-би») - сигнализации [37].

Также оценено влияние экстракта на острое повреждение легких, вызванное липополисахаридом. Результаты показали, что экстракт ингибировал липрполисахарид-индуцированную продукцию TNF-α и интерлейкина-6 дозозависимым образом. Также было замечено, что ослабление индуцированных гистопатологических изменений в легких. Таким образом, защитный эффект хлороформной фракции этанольного экстракта на липополисахарид-индуцированное острое повреждение легких у мышей может быть связан с подавлением чрезмерной воспалительной реакции в легочной ткани [37].

Показано, что в клетках мышиных макрофагов 264,7, обработанных неочищенными полисахаридами, выделенными из стеблей растения Trapa quadrispinosa, значительно подавлены процессы высвобождения оксида азота NO, фактора некроза опухоли-α TNF-α и интерлейкина-6, а также снижен уровень экспрессии их матричной РНК [38].

Применение в косметологии и трихологии.

Экономический рост и увеличение продолжительности жизни повысили интерес к физической красоте, в связи с чем по всему миру проводятся исследования по оценке антивозрастных и оздоровительных свойств биоактивных веществ. Японскими учеными изучалась возможность применения околоплодника водяного ореха Trapa natans в качестве косметического средства с омолаживающим эффектом, обусловленным содержанием полифенолов, выделенных из спиртового экстракта. Гидролизуемые полифенолы в составе проявили высокую антиоксидантную и антигликационную активность. Кроме того, были обнаружены ингибиторы гиалуронидазы, эластазы и коллагеназы. В частности, эвгенин и трапаин, которые содержат большое количество остатков галловой кислоты и гексагидрокси-дифенильную группу, проявили высокую ингибирующую активность в отношении вышеуказанных ферментов. Таким образом, полифенолы, содержащиеся в Trapa natans, могут оказывать омолаживающее действие [21].

Растворимые фракции ферментированного экстракта плодов Trapa japonica стимулируют синтез коллагена через TGF-β1/GSK-3β/β-катениновый путь в клетках дермальных фибробластов человека, что показывает возможность их использования в косметологии [39].

Gun He Nam и соавт. (Южная Корея) выделили биоактивный пептид AC2 из плодов Trapa japonica. Для выделения пептида использовались различные экспериментальные методы, такие как ферментация бактериями р. Bacillus и жидкостная хроматография. Обнаружено, что он перспективен для воздействия на клетки дермальных сосочков человека. Известно, что дигидротестостерон вызывает стресс у клеток дермальных сосочков человека и является одной из основных причин выпадения волос, обусловленных гормонами и факторами окружающей среды. Пептид AC2 защищает клетки дермальных сосочков человека, обработанные дигидротестостероном, подавляя аутофагию и апоптоз. Кроме того, Gun He Nam и соавт. синтезировали пептид AC2 в качестве альтернативы дорогостоящим и сложным процедурам выделения и очистки. Показано сходство эффектов синтетического пептида AC2 с эффектами выделенного и очищенного пептида AC2. Растущая роль пептида AC2 является важной проблемой и играет ключевую роль в новом подходе к клеточной терапии облысения [40, 41].

Рогульник как нетрадиционный источник крахмала

Внастоящее время основное вниманиеуделяетсявыявлениюнетрадиционныхисточниковкрахмаласразличнымисвойствамидлярасширенияпромышленногоприменения, в том числе в фармации.Поискальтернативныхисточниковкрахмаласразличнымисвойствамиявляется актуальной задачей [42].

Возможность получения композитных пленок на основе наночастиц крахмала Trapa bispinosa исследованы индийскими учеными Chandni Dularia и соавт. Съедобные пищевые пленки и покрытия помогают увеличить срок хранения продуктов, нетоксичны и биоразлагаемы, что помогает ограничить загрязнение окружающей среды. Нанокрахмал был получен методом кислотного гидролиза с выходом 27,5%. Оценивали толщину, влагосодержание, скорость паропропускания, водорастворимость, прочность на разрыв пленок из нативного крахмала и нанокрахмальных композитов. Морфологическое и поверхностное исследование нативного крахмала и наночастиц крахмала показало, что поверхность нативного крахмала была овальной, эллипсоидной и гладкой без трещин, в то время как поверхность наночастиц крахмала имела неправильную форму с трещинами. Включение нанокрахмала приводит к увеличению толщины и прочности на разрыв, в то время как содержание влаги, скорость пропускания водяного пара и растворимость пленок уменьшаются, что является существенными характеристиками качественной упаковки.

Крахмал, полученный из водяного ореха, может быть использован как потенциальное связующее вещество в фармацевтической промышленности [43].

Заключение

Изучение возможностей применения рогульника выявило разносторонность использования растения в медицинской и фармацевтической практике.

Водяной орех проявляет различные виды активности, такие как антиоксидантное, гепатопротекторное, противовоспалительное, противораковое, противогрибковое, антибактериальное действие. Значительное количество исследований доказывают гипогликемическую активность различных частей растения и возможность использования как пищевой добавки для естественной терапии гипергликемии или лекарственного средства при сахарном диабете. С помощью снижения уровня конечных продуктов гликирования при применении экстракта оболочек плодов чилима представлен потенциал растения в лечении бесплодия. Антипролиферативный эффект растения ряд исследователей связывают с фенольными соединениями. Показана эффективность экстрактов и выделенных групп веществ из различных частей рогульника против рака толстой кишки, опухоли молочной железы, раковой опухоли шейки матки, гепатоцеллюлярной карциномы человека, аденокарциномы желудка, глиомы.

Таким образом, рогульник является перспективным лекарственным растением, требующим дальнейшего изучения его химического состава, фармакологических свойств и внедрения в научную медицину.

×

Об авторах

Елена Владимировна Михайлова

ФГБОУ ВО «Воронежский государственный медицинский университет им. Н.Н. Бурденко» Минздрава России

Автор, ответственный за переписку.
Email: milenok2007@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-1862-065X

Кандидат биологических наук, доцент кафедры организации фармацевтического дела, клинической фармации и фармакогнозии 

Россия, 394036, Россия, Воронеж, ул. Студенческая, 10

Сергей Сергеевич Попов

ФГБОУ ВО «Воронежский государственный медицинский университет им. Н.Н. Бурденко» Минздрава России

Email: popov-endo@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-4438-9201

доктор медицинских наук, доцент, заведующий кафедрой организации фармацевтического дела, клинической фармации и фармакогнозии

Россия, 394036, Россия, Воронеж, ул. Студенческая, 10

Татьяна Александровна Бредихина

ФГБОУ ВО «Воронежский государственный медицинский университет им. Н.Н. Бурденко» Минздрава России

Email: bredichina-tat@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0003-2300-0313

кандидат фармацевтических наук, доцент кафедры организации фармацевтического дела, клинической фармации и фармакогнозии

Россия, 394036, Россия, Воронеж, ул. Студенческая, 10

Список литературы

  1. Chupina IS, Silant'eva MM, Kurepina NYu. Distribution of Trapa natans S.L. (Lythraceae) in Altai krai: historical data and new locations. Rastitelʹnyj mir aziatskoj Rossii. 2021;14(2):151-161. (In Russ.) [Чупина И.С., Силантьева М.М., Курепина Н.Ю. О распространении Trapa natans L. S.L. (Lythraceae) в Алтайском крае: исторические данные и новые местонахождения. Растительный мир Азиатской России: Вестник Центрального сибирского ботанического сада СО РАН. 2021;14(2):151-161]. doi: 10.15372/RMAR20210205
  2. Arbuzova GA, Gorbunova AI, Chepinoga VV. The water chestnut (Trapa natans L., Lythraceae) in Irkutsk region. Vestnik Buryatskogo gosudarstvennogo universiteta. Biologiya, geografiya. 2019;1:29-36. (In Russ.) [Арбузова Г.А., Горбунова А.И., Чепинога В.В. Рогульник плавающий (Trapa natans L., Lythraceae) в Иркутской области. Вестник Бурятского государственного университета. Биология, география. 2019;1:29-36]. doi: 10.18101/2587-7143-2019-1-29-36
  3. Lu H, Zuo Y, Meng X, et al. Phenolic profiles, antioxidant activity and inhibition of digestive enzymes of water caltrop pericarps. J. Sci. Food Agric. 2022;102(6):2342-2351. doi: 10.1002/jsfa.11572
  4. Wang CC, Chen HF, Wu JY, et al. Stability of Principal Hydrolysable Tannins from Trapa taiwanensis Hulls. Molecules. 2019;24(2):365. doi: 10.3390/molecules24020365.
  5. Yasuda M, Yasutake K, Hino M, et al. Inhibitory effects of polyphenols from water chestnut (Trapa japonica) husk on glycolytic enzymes and postprandial blood glucose elevation in mice. Food Chem. 2014;165:42-49. doi: 10.1016/j.foodchem.2014.05.083
  6. Banu WZ, Dasgupta D, Hazarika I, et al. Trapa natans L.: A Journey from Traditional to Contemporary Therapies - A Review. The Natural Products Journal. 2023;13(8): e300323215263. doi: 10.2174/2210315513666230330182909
  7. Mikhailova EV, Artyukhin AE, Zul'karnaeva ESh, et al. Water chestnut - the plant of the future. In: IX S"ezd obshchestva fiziologov rastenii Rossii «Fiziologiya rastenii - osnova sozdaniya rastenii budushchego». Kazan, 2019:292 (In Russ.) [Михайлова Е.В., Артюхин А.Е., Зулькарнаева Е.Ш., и др. Водяной орех - растение будущего. В кн.: IX Съезд общества физиологов растений России «Физиология растений - основа создания растений будущего». Казань, 2019: 292]. doi: 10.26907/978-5-00130-204-9-2019-292
  8. Chupina IS, Silant'eva MM. Fruits polymorphism of European water chestnut populations in the Altai Krai. Acta Biologica Sibirica. 2019;5(4): 66-72. (In Russ.) [Чупина И.С., Силантьева М.М. Полиморфизм плодов популяций Trapa natans L. на территории Алтайского края. Acta Biologica Sibirica. 2019;5(4): 66-72]. doi: 10.14258/abs.v5.i4.7058
  9. Kuluev BR, Artyukhin AE, Shevchenko AM, et al. Water chestnut Trapa L.: biology, habitat and the study of its isolated populations in the lakes of Nurimanovsky district in the republic of Bashkortostan. Biomics. 2017; 9(2): 101-118. (In Russ.) [Кулуев Б.Р., Артюхин А.Е., Шевченко А.М., и др. Водяной орех плавающий Trapa L.: биология, ареал распространения и исследование его изолированных популяций в озерах Нуримановского района республики Башкортостан. Биомика. 2017; 9(2): 101-118].
  10. Alfasane MA, Moniruzzaman K, Rahman MM. Biochemical composition of the fruits of water chestnut (Trapa bispinosa Roxb), Dhaka University Journal of Biological Sciences. 2011;20(1):95–98. doi: 10.3329/dujbs.v20i1.8879
  11. Ivana D. Radojevic, Sava M. Vasic, Milan S. Dekic, et al. Antimicrobial and antibiofilm effects of extracts from Trapa natans L., evaluation of total phenolic and flavonoid contents and GC-MS analysis Acta Pol. Pharm. 2016;73(6):1565-1574. PMID: 29634111
  12. Aleksic I, Ristivojevic P, Pavic A, et al. Anti-quorum sensing activity, toxicity in zebrafish (Danio rerio) embryos and phytochemical characterization of Trapa natans leaf extracts. J Ethnopharmacol. 2018;222:148-158. doi: 10.1016/j.jep.2018.05.005
  13. Kharbanda C, Sarwar Alam M, Hamid H, et al. Trapa natans L. root extract suppresses hyperglycemic and hepatotoxic effects in STZ-induced diabetic rat model. J Ethnopharmacol. 2014; 151(2): 931-936. doi: 10.1016/j.jep.2013.12.007
  14. Raza A, Li F, Xu X, et al. Optimization of ultrasonic-assisted extraction of antioxidant polysaccharides from the stem of Trapa quadrispinosa using response surface methodology. Int J Biol Macromol. 2017;94(Pt A):335-344. doi: 10.1016/j.ijbiomac.2016.10.033
  15. Li F, Mao YD, Wang YF, et al. Optimization of Ultrasonic-Assisted Enzymatic Extraction Conditions for Improving Total Phenolic Content, Antioxidant and Antitumor Activities In Vitro from Trapa quadrispinosa Roxb. Residues. Molecules. 2017;22(3):396. doi: 10.3390/molecules22030396
  16. Gani A, Rasool N, Shah A, et al. DNA scission inhibition, antioxidant, and antiproliferative activities of water chestnut (Trapa natans) extracted in different solvents. CyTA –Journal of Food. 2015;13(3):415–419. doi: 10.1080/19476337.2014.992967
  17. Hussain T, Gehad MS, Firdous H. Hepatoprotective Evaluation of Trapa natans against Drug-induced Hepatotoxicity of Antitubercular Agents in Rats. Pharmacognosy Magazine. 2018;14(54):180-185. doi: 10.4103/pm.pm_237_17
  18. Lu Han, Jian Tun-yu, Ding Xiao-qin, et al. Trapa natans pericarp extract ameliorates hyperglycemia and hyperlipidemia in type 2 diabetic mice. Revista Brasileira de Farmacognosia. 2019;29(5):631–636. doi: 10.1016/j.bjp.2019.04.011
  19. Lu Han , Meng Xiuhua, Ding Xiaoqin, et al. Gallotannin, Isolated from Pericarp of Water Caltrop Ameliorates High-Fat Diet-Induced Nonalcoholic Fatty Liver Disease in Mice. J Agric Food Chem. 2023;71(18):7046-7057. doi: 10.1021/acs.jafc.3c01099.
  20. Wang L, Yin D, Fan Y, et al. Molecular mechanism of the anti-gastric cancer activity of 1,2,3,6-tetra-O-galloyl-β-D-glucose isolated from Trapa bispinosa Roxb. shell in vitro. PLoS One. 2022;17(6):e0269013. doi: 10.1371/journal.pone.0269013
  21. Yasuda M., Ikeoka M., Kondo S.-I. Skin-related enzyme inhibitory activity by hydrolyzable polyphenols in water chestnut (Trapa natans) husk. Biosci Biotechnol Biochem. 2021;85(3):666-674. doi: 10.1093/bbb/zbaa076
  22. Malviya N, Jain S, Jain A, et al. Evaluation of in vitro antioxidant potential of aqueous extract of Trapa natans L. fruits. Acta Pol Pharm. 2010;67(4):391-396. PMID: 20635535.
  23. Sun X, Lei Q, Chen Q, et al. Biphasic Fermentation of Trapa bispinosa Shells by Ganoderma sinense and Characterization of Its Polysaccharides and Alcoholic Extract and Analysis of Their Bioactivity. Molecules. 2024;29(6):1238. doi: 10.3390/molecules29061238
  24. Jinno M, Nagai R, Takeuchi M, et al. Trapa bispinosa Roxb. extract lowers advanced glycation end-products and increases live births in older patients with assisted reproductive technology: a randomized controlled trial. Reprod Biol Endocrinol. 2021;19(1):149. doi: 10.1186/s12958-021-00832-y
  25. Chang YW, Huang WC, Lin CY, et al. Tellimagrandin II, A Type of Plant Polyphenol Extracted from Trapa bispinosa Inhibits Antibiotic Resistance of Drug-Resistant Staphylococcus aureus. Int J Mol Sci. 2019;20(22):5790. doi: 10.3390/ijms20225790
  26. Kuluev BR, Zulkarnaeva ESh, Artyukhin AE, et al. Antibacterial activity of alcohol extract of the water caltrop endocarps. Ecobiotech. 2018;1(1): 45-51(In Russ.) [Кулуев Б.Р., Зулькарнаева Е.Ш., Артюхин А.Е. и др. Антибактериальная активность спиртового экстракта эндокарпиев водяного ореха Trapa sibirica Fler. Экобиотех.2018;1(1):45-51]. doi: 10.31163/2618-964X-2018-1-1-45-51
  27. Wang SH, Kao MY, Wu SC, et al. Oral administration of Trapa taiwanensis Nakai fruit skin extracts conferring hepatoprotection from CCl4-caused injury. J Agric Food Chem. 2011;59(8):3686-3692. doi: 10.1021/jf1048386
  28. Mondal M, Bhattacharya S, Biswas M. Hepatoprotective activity of Trapa natans fruit peel extracts against paracetamol‑induced liver damage in rats. Elixir Pharmacy 2013;60:16461-16463.
  29. Iwaoka Y, Suzuki S, Kato N, et al. Characterization and Identification of Bioactive Polyphenols in the Trapa bispinosa Roxb. Pericarp Extract. Molecules. 2021;26(19):5802. doi: 10.3390/molecules26195802
  30. Hui-Chi Huang, Chien-Liang Chao, Chia-Ching Liaw, et al. Hypoglycemic Constituents Isolated from Trapa natans L. Pericarps. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 2016;64(19):3794-3803. doi: 10.1021/acs.jafc.6b01208
  31. Ahmad N, Sharma AK, Sharma S, et al. Biosynthesized composites of Au-Ag nanoparticles using Trapa peel extract induced ROS-mediated p53 independent apoptosis in cancer cells. Drug and Chemical Toxicology. 2019;1:43-53. doi: 10.1080/01480545.2018.1463241.
  32. Mandal SM, Migliolo L, Franco OL, et al. Identification of an antifungal peptide from Trapa natans fruits with inhibitory effects on Candida tropicalis biofilm formation. Peptides. 2011;32(8):1741-1747. doi: 10.1016/j.peptides.2011.06.020
  33. Kim YS, Hwang JW, Han YK, et al. Antioxidant activity and protective effects of Trapa japonica pericarp extracts against tert-butylhydroperoxide-induced oxidative damage in Chang cells. Food Chem Toxicol. 2014;64:49-56. doi: 10.1016/j.fct.2013.11.018
  34. Singh S, Kumar V, Kumar N, et al. Protective and Modulatory Effects of Trapa bispinosa and Trigonella foenum-graecum on Neuroblastoma Cells Through Neuronal Nitric Oxide Synthase. Assay Drug Dev Technol. 2020;18(1):64-74. doi: 10.1089/adt.2018.912
  35. Ishida H, Shibata T, Shibata S, et al. Lutein plus Water Chestnut (Trapa bispinosa Roxb.) Extract Inhibits the Development of Cataracts and Induces Antioxidant Gene Expression in Lens Epithelial Cells. Biomed Res Int. 2020;2020:9204620. doi: 10.1155/2020/9204620
  36. Ambikar DB, Harle UN, Khandare RA, et al. Neuroprotective effect of hydroalcoholic extract of dried fruits of Trapa bispinosa Roxb on lipofuscinogenesis and fluorescence product in brain of D-galactose induced ageing accelerated mice. Indian J Exp Biol. 2010;48(4):378-382. PMID: 20726336
  37. Kim Y.-S., Hwang JW, Jang JH, et al. Trapa japonica Pericarp Extract Reduces LPS-Induced Inflammation in Macrophages and Acute Lung Injury in Mice. Molecules. 2016;21(3):392. doi: 10.3390/molecules21030392
  38. Li F, Liu X, Yu X, et al. Optimization of the extraction, preliminary characterization, and anti-inflammatory activity of crude polysaccharides from the stems of Trapa quadrispinosa. RSC Adv. 2019;9(39):22540-22550. doi: 10.1039/c8ra09994d
  39. Nam GH, Kawk HW, Kim SY, et al. Solvent fractions of fermented Trapa japonica fruit extract stimulate collagen synthesis through TGF-β1/GSK-3β/β-catenin pathway in human dermal fibroblasts. J Cosmet Dermatol. 2020;19(1):226-233. doi: 10.1111/jocd.13253
  40. Nam GH, Jo KJ, Park YS, et al. The peptide AC 2 isolated from Bacillus-treated Trapa japonica fruit extract rescues DHT (dihydrotestosterone)-treated human dermal papilla cells and mediates mTORC1 signaling for autophagy and apoptosis suppression. Sci Rep. 2019;9(1):16903. doi: 10.1038/s41598-019-53347-3
  41. Nam GH, Jo KJ, Park YS, et al. Bacillus/Trapa japonica Fruit Extract Ferment Filtrate enhances human hair follicle dermal papilla cell proliferation via the Akt/ERK/GSK-3β signaling pathway. BMC Complement Altern Med. 2019;19(1):104. doi: 10.1186/s12906-019-2514-8
  42. Naseem S, Bhat SU, Gani A, et al. Starch exploration in Nelumbo nucifera and Trapa natans: Understanding physicochemical and functional variations for future perspectives Int J Biol Macromol. 2024;274(2):133077. doi: 10.1016/j.ijbiomac.2024.133077
  43. Dularia C, Sinhmar A, Thory R, et al. Development of starch nanoparticles based composite films from non-conventional source - Water chestnut (Trapa bispinosa). Int J Biol Macromol. 2019;136:1161-1168. doi: 10.1016/j.ijbiomac.2019.06.169

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© Михайлова Е.В., Попов С.С., Бредихина Т.А.,

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.