Markers of inflammation in the oral fluid of patients in need of dental prosthetics

Full Text

ВВЕДЕНИЕ

Ротовая жидкость представляет собой смешанный секрет трех пар больших и множества малых слюнных желез (слюна), жидкости зубодесневого желобка (десневая жидкость), транссудата плазмы крови, лейкоцитов, слущенных клеток эпителия полости рта, остатков пищи, микрофлоры и продуктов ее жизнедеятельности. Заинтересованность в исследовании ротовой жидкости исторически возникла раньше, чем в исследовании другой биологической жидкости – крови, чему посвящены многочисленные исследования академика И.П. Павлова. Вместе с тем объектом повседневной диагностики в отличие от анализа составных компонентов крови ротовая жидкость не стала до сих пор, причем ни в теоретическом плане, ни в прикладном аспекте [1]. В связи с ростом возможностей исследования альтернативных биожидкостей и появлением на рынке высокотехнологичной лабораторно-диагностической аппаратуры исследование показателей ротовой жидкости все чаще применяется при тестировании патологических синдромов и заболеваний как полости рта, так и организма в целом. Во многом это связано с доступностью данной биосреды и отсутствием сложностей в ее получении [2, 3]. Кроме того, несомненным достоинством является высокая теснота связей показателей саливаобразцов с аналогичными показателями крови при проведении корреляционого анализа. Таким образом, биомаркеры ротовой жидкости способны выступать в роли альтернативы индикаторам, полученным травматичными инвазивными методами [4].

В роли подобных эндогенных предикторов воспаления, циркулирующих в полости рта и определяющих устойчивость организма к воздействию экзогенных флогогенных агентов, выступают маркеры воспалительного процесса. Ротовая жидкость способствует сохранению гомеостаза, выполняя определенную буферную роль и участвуя в метаболизме собственных клеток ротовой полости. В литературе представлено немало исследований маркеров воспалительного процесса в ротовой жидкости [5, 6]: воспалительные цитокины – IL-1, IL-4, IL-7, IL-18, IFN-γ, и MIP-1α [7–9]; антимикробные белки – лактоферрин и кальпротектин [10]; белки, опосредующие инфлюэнцию, – СРБ [11, 12]. Кроме того, в создании и поддержании постоянства внутренней среды организма центральную роль играют процессы взаимовлияния ротовой жидкости и микробиоты. Микробный фактор считается определяющим в формировании зубных бляшек и соответственно в развитии кариозного процесса и патологии тканей периодонта. Различные компоненты ротовой жидкости противодействуют процессу возникновения и роста зубных бляшек, бактериальных биопленок с помощью целого ряда механизмов. В литературе рассматриваются варианты бактерицидных воздействий компонентов ротовой жидкости, роль прямой элиминации патологических агентов через их связывание с компонентами смешанной слюны.

Таким образом, с точки зрения лабораторной иммунодиагностики, исследование ротовой жидкости может быть эффективным, быстрым, достоверным методом неинвазивного исследования. Однако отсутствие перечня достоверных иммунологических саливапараметров с расшифровыванием их диагностической ценности требует дальнейшего поиска [1, 8, 10, 11].

ЦЕЛЬ

Оценить маркеры воспалительного процесса в ротовой жидкости пациентов, нуждающихся в ортопедической стоматологической помощи.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Исследование проводилось на базе кафедр ортопедической стоматологии, фундаментальной и клинической биохимии с лабораторной диагностикой ФГБОУ ВО СамГМУ Минздрава России, клинико-диагностической лаборатории Клиник СамГМУ. Объектами послужили 40 человек, среди которых было 20 пациентов контрольной группы и 20 пациентов, нуждающихся в стоматологической ортопедической помощи, с показателями неудовлетворительной гигиены полости рта на стадии первичной консультации и после проведения санирующих гигиенических мероприятий. Для оценки стоматологического статуса применялись индексы КПУ, гигиенический, Грина – Вермильона. Исследование медиаторов иммунного ответа в ротовой жидкости – интерлейкинов-1, -6 – проводилось количественным ИФА-методом с помощью тест-систем производства «Вектор-Бест» (Россия) на полуавтоматическом анализаторе «Лазурит». Определение количества иммуноглобулина класса А и количественное определение СРБ проводилось иммунотурбидиметрическим методом на автоматическом биохимическом анализаторе Cobas Integra+ (Roche) c помощью тест-систем производства Roche (Германия). Статистическая обработка результатов исследования включала проверку вариационных рядов на нормальность распределения по критерию Шапиро – Уилка. Применяли непараметрический дисперсионный анализ Краскела – Уоллиса. Также для определения различий между группами использовали критерий Стъюдента, медианы и квартили (25% и 75%).

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

При сопоставлении данных пациентов контрольной группы с удовлетворительным стоматологическим статусом и пациентов, нуждающихся в стоматологическом протезировании, с неудовлетворительными гигиеническими показателями (таблица 1) обращает на себя внимание значимое отклонение в этой группе показателей СРБ – более чем в 4 раза и интерлейкина-1 – на 158%.

 

Таблица 1 / Table 1

Гигиенические индексы и маркеры воспаления в ротовой жидкости контрольной группы и пациентов, нуждающихся в стоматологическом протезировании

Hygienic indices and inflammation markers in the oral fluid of the control group and patients requiring dental prosthetics

Показатель		IgA, г/л	IL-1, пг/мл	IL-6, пг/мл	CРБ, мг/л	Индекс КПУ	Индекс Грина – Вермильона	Санация +/-
Контрольная группа	Ме	0,04	174,4	1,95	0,5	4,3	0,6	+
	Q1-Q3	0,03-0,07	23,7-209,4	0,8-3,1	0,2-1,2	3-7	0-1	+
Пациенты первичного ортопедического приема	Ме	0,06	275,6	2,15	2,2	6,7	2,3	-
	Q1-Q3	0,02-0,09	187,4-303,4	1,8-3,7	0,5-3,1	6-10	1,8-2,6	-

 

По своей биологической роли IL-1 принадлежит к основным провоспалительным цитокинам, источниками которого в нашем организме являются в основном лимфоциты, макрофаги. По своему строению он является полипептидом с молекулярной массой 15 кД. Свою биологическую роль IL-1 реализует через стимуляцию синтеза белков острой фазы, активацию вторичного цитокинового ответа Т- и В-лимфоцитов, активацию хемотаксиса, фагоцитоза нейтрофилов, влияние на синтез молекул адгезии, простагландинов, простациклинов. Кроме того, есть данные о стимуляции им синтеза основного белка соединительной ткани – коллагена [1].

Содержание интерлейкина-6 и иммуноглобулина А также изменилось, но отклонения наблюдались в рамках референсных интервалов и не превысили порог доказательности.

При анализе данных тех же пациентов, нуждающихся в стоматологическом протезировании, после проведения санирующих и гигиенических мероприятий (таблица 2) отмечаются максимально выраженные изменения уровня СРБ в виде снижения показателя на 70,5%.

 

Таблица 2 / Table 2

Гигиенические индексы и маркеры воспаления в ротовой жидкости пациентов, нуждающихся в стоматологическом протезировании, на первичном приеме и после санации

Hygienic indices and inflammation markers in the oral fluid of patients requiring dental prosthetics, at the initial appointment and after sanitation

Показатель		IgA, г/л	IL-1, пг/мл	IL-6, пг/мл	CРБ, мг/л	Индекс КПУ	Индекс Грина – Вермильона	Санация +/-
Пациенты первичного ортопедического приема	Ме	0,06	275,6	2,15	2,2	6,7	2,3	-
	Q1-Q3	0,02-0,09	187,4-303,4	1,8-3,7	0,5-3,1	6-10	1,8-2,6	-
Пациенты, нуждающиеся в стоматологическом протезировании, после санации	Ме	0,05	209,6	2,0	0,65	6,7	0	+
	Q1-Q3	0,02-0,07	159,9-255,1	1,7-3,2	0,2-1,63	6-10	0	+

 

Отмечается некоторое снижение ранее повышенных показателей содержания интерлейкина-6 и интерлейкина-1.

Интерлейкин-6 является по своей химической структуре гликопротеином, который синтезируется как лимфоидными, так и нелимфоидными клетками организма, его уровень зависит от уровня фактора некроза опухоли α, интерлейкина-1. Интерлейкин-1 и интерлейкин-6 могут иметь как однонаправленный, так и разнонаправленный механизмы действия. Так, имеются данные о противовоспалительном эффекте интерлейкина-6 [1]. Известно, что иммунные клетки, эндотелиоциты, эпителиоциты, фибробласты являются потенциальными производителями интерлейкина-6. Локализованные альтеративные процессы могут сопровождаться повышением уровня этого цитокина как в крови, так и в биологических субстратах зоны поражения, в том числе в полости рта. Например, имеются данные о росте содержания интерлейкина-6 в слюне при хроническом генерализованном периодонтите, красном плоском лишае слизистой оболочки полости рта и, напротив, отсутствие его при гингивите и афтозном стоматите. В целом немногочисленные литературные данные в отношении ассоциации концентрации интерлейкина-6 в крови, слюне и десневой жидкости при патологии периодонта и слизистой оболочки полости рта достаточно разноречивы [13–15]. Выявлено, что интерлейкин-6 играет важную роль в возникновении и развитии клеточной дифференцировки. Кроме того, он может способствовать тромбозу, поскольку данный цитокин побуждает организм вырабатывать не только С-реактивный белок, но и фибриноген во время развития воспалительных процессов. Обнаружено, что интерлейкин-6 оказывает эффект хемотаксиса на многие клетки во время воспалительных реакций, включая нейтральные лимфоциты и мононуклеарные макрофаги [16].

ВЫВОДЫ

Таким образом, индикаторами риска развития воспалительных процессов в организме могут выступать провоспалительные цитокины, полученные неинвазивными методами. Динамическое исследование цитокинового профиля ротовой жидкости пациентов, нуждающихся в стоматологическом протезировании, может рассматриваться как важный диагностический инструмент целесообразности стоматологической санации. Баланс содержания белков цитокинового ответа и острой фазы до и после протезирования являются объективными критериями адекватной подготовки пациента к ортопедической помощи и возникновения возможных рецидивов. Уровень СРБ в ротовой жидкости является достоверным и быстрореагирующим показателем воспалительного ответа и мониторинга проводимой терапии.

ДОПОЛНИТЕЛЬНАЯ ИНФОРМАЦИЯ

Источник финансирования. Исследование проводилось без спонсорской поддержки.

Конфликт интересов. Авторы декларируют отсутствие явных и потенциальных конфликтов интересов, связанных с содержанием настоящей статьи.

Участие авторов. Карташов В.В. – выбор и подготовка пациентов к исследованию стоматологического профиля, проведение исследования, наблюдение за пациентами, анализ полученных результатов. Нестеров А.М. – научное руководство, концепция и дизайн исследования. Селезнева И.А. – научное руководство, выбор методов и проведение анализов показателей ротовой жидкости.

Все авторы одобрили финальную версию статьи перед публикацией, выразили согласие нести ответственность за все аспекты работы, подразумевающую надлежащее изучение и решение вопросов, связанных с точностью или добросовестностью любой части работы.

Конфликт интересов: не заявлен.

ADDITIONAL INFORMATION

Study funding. The study was conducted without sponsorship.

Conflict of Interest. The authors declare that there are no obvious or potential conflicts of interest associated with the content of this article.

Contribution of individual authors. Kartashov V.V.: selection and preparation of patients for dental profile examination, conducting the examination, monitoring patients, analysis of the obtained results. Nesterov A.M.: scientific supervision, concept and design of the study. Selezneva I.A.: scientific supervision, selection of methods, and conducting analyses of oral fluid indicators.

The authors gave their final approval of the manuscript for submission, and agreed to be accountable for all aspects of the work, implying proper study and resolution of issues related to the accuracy or integrity of any part of the work.

Conflict of Interest: nothing to disclose.

About the authors

Vladislav V. Kartashov

Samara State Medical University

Author for correspondence.
Email: stomkvv@gmail.com
ORCID iD: 0000-0002-8671-2898

MD, postgraduate student of the Department of Orthopedic Dentistry

Russian Federation, Samara

Aleksandr M. Nesterov

Samara State Medical University

Email: nesterov003@rambler.ru
ORCID iD: 0000-0001-8487-7392

MD, Dr. Sci. (Medicine), Professor, Head of the Department of Orthopedic Dentistry

Russian Federation, Samara

Inna A. Selezneva

Samara State Medical University

Email: Innola@mail.ru
ORCID iD: 0000-0001-6647-5330

MD, Dr. Sci. (Medicine), Associate Professor, Professor of the Department of Fundamental and Clinical Biochemistry with Laboratory Diagnostics

Russian Federation, Samara

References

Supplementary files